科技之光,研發(fā)未來(lái)-特殊染色技術(shù)服務(wù)檢測(cè)中心
常規(guī)HE染色技術(shù)服務(wù)檢測(cè)中心:專業(yè)、高效-生物醫(yī)學(xué)
科研的基石與質(zhì)量的保障-動(dòng)物模型復(fù)制實(shí)驗(yàn)服務(wù)檢測(cè)中心
科技之光照亮生命奧秘-細(xì)胞熒光顯微鏡檢測(cè)服務(wù)檢測(cè)中心
揭秘微觀世界的窗口-細(xì)胞電鏡檢測(cè)服務(wù)檢測(cè)中心
科研的基石與創(chuàng)新的搖籃-細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)檢測(cè)中心
科研的堅(jiān)實(shí)后盾-大小動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)檢測(cè)中心
推動(dòng)生命科學(xué)進(jìn)步的基石-細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
科技前沿的守護(hù)者-細(xì)胞藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)檢測(cè)中心
科研前沿的探索者-細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)服務(wù)檢測(cè)中心
免疫熒光在傳染病發(fā)病機(jī)制研究中發(fā)揮著重要的作用,為深入了解傳染病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程提供了重要依據(jù)。在細(xì)菌傳染病研究中,以結(jié)核桿菌***為例。免疫熒光可以標(biāo)記結(jié)核桿菌在宿主細(xì)胞內(nèi)的定位,以及結(jié)核桿菌***引起的宿主細(xì)胞免疫反應(yīng)相關(guān)分子。通過(guò)觀察結(jié)核桿菌在巨噬細(xì)胞等細(xì)胞內(nèi)的生存狀態(tài),如是否被吞噬體包裹、是否能夠逃逸溶酶體的殺傷等,以及宿主細(xì)胞內(nèi)免疫分子如細(xì)胞因子、***肽等的表達(dá)和分布情況,可以深入研究結(jié)核桿菌的致病機(jī)制。這有助于開(kāi)發(fā)新的抗結(jié)核藥物和疫苗。在病毒傳染病研究中,如**病毒(HIV)***。免疫熒光可用于標(biāo)記HIV病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程,包括病毒基因組的整合、病毒蛋白的合成等。同時(shí),還可以標(biāo)記宿主細(xì)胞表面的HIV受體和共受體,觀察HIV是如何與宿主細(xì)胞結(jié)合并進(jìn)入細(xì)胞的。這對(duì)于理解HIV的發(fā)病機(jī)制以及尋找有效的治療方法具有重要意義。免疫熒光技術(shù)可以用于研究免疫相關(guān)疾病和自身免疫病。r-H2AX免疫組化IHC
細(xì)胞的固定及免疫熒光:注意事項(xiàng):(1)取細(xì)胞爬片時(shí),動(dòng)作應(yīng)輕柔,防止將細(xì)胞爬片夾碎,影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。(2)種細(xì)胞過(guò)程中,要注意將細(xì)胞輕柔混勻,“八”字或者“十”字形搖晃,防止細(xì)胞局部生長(zhǎng)過(guò)密。(3)稀釋、加二抗(熒光抗體)及此后的洗滌過(guò)程中注意避光。(4)細(xì)胞爬片進(jìn)行免疫熒光之后,需要盡快拍照,防止免疫熒光淬滅。或者放于暗盒內(nèi),暫時(shí)保存于4度冰箱,盡快拍照。(5)在進(jìn)行熒光顯微鏡拍照時(shí),要根據(jù)熒光抗體選擇合適的激發(fā)光源。PI/DAPI能將凋亡和未凋亡的細(xì)胞都染成紅色/藍(lán)色,只在凋亡的細(xì)胞核中才有FITC-12-dUTP摻入而定位的綠色熒光。cyclinD1免疫熒光分析免疫熒光技術(shù)可以通過(guò)熒光信號(hào)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的抗原或半抗原物質(zhì)。
免疫熒光具有追蹤生物分子動(dòng)態(tài)的***能力,為研究生物分子的行為提供了實(shí)時(shí)的視角。在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)研究中,許多蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)合成后需要被轉(zhuǎn)運(yùn)到特定的位置才能發(fā)揮作用。利用免疫熒光標(biāo)記目標(biāo)蛋白質(zhì),可以觀察到它從合成部位,如內(nèi)質(zhì)網(wǎng),經(jīng)過(guò)高爾基體,**終到達(dá)細(xì)胞膜或其他細(xì)胞器的整個(gè)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程。這有助于理解細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)分選和運(yùn)輸?shù)臋C(jī)制,以及在病理狀態(tài)下這些過(guò)程是如何被打亂的。在基因表達(dá)調(diào)控的研究中,免疫熒光可以用來(lái)追蹤轉(zhuǎn)錄因子的動(dòng)態(tài)。轉(zhuǎn)錄因子是調(diào)節(jié)基因表達(dá)的關(guān)鍵分子,它們?cè)诩?xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)之間穿梭。通過(guò)免疫熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子,能夠看到它們?cè)诩?xì)胞受到外界刺激時(shí)的入核和出核動(dòng)態(tài),從而深入研究基因表達(dá)調(diào)控的時(shí)空機(jī)制。
熒光抗體技術(shù):抗原抗體反應(yīng)后,利用熒光顯微鏡判定結(jié)果的檢測(cè)方法。免疫熒光測(cè)定:抗原抗體反應(yīng)后,利用特殊儀器測(cè)定熒光強(qiáng)度而推算被測(cè)物濃度的檢測(cè)方法。免疫熒光實(shí)驗(yàn)步驟:直接法測(cè)抗原:基本原理:將熒光素標(biāo)記在相應(yīng)的抗體上,直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。其優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點(diǎn)是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細(xì)菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。免疫熒光技術(shù)利用熒光染料標(biāo)記的抗體與目標(biāo)分子結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)可視化檢測(cè)。
免疫熒光是解析生物分子定位的有力工具。它能夠在細(xì)胞或組織的復(fù)雜環(huán)境中,精確地指出特定生物分子的所在之處。在發(fā)育生物學(xué)研究中,胚胎發(fā)育過(guò)程涉及到眾多基因的表達(dá)和調(diào)控。免疫熒光可以標(biāo)記那些在胚胎發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的蛋白質(zhì)。例如,在神經(jīng)管發(fā)育過(guò)程中,標(biāo)記參與神經(jīng)管形成的特定蛋白,觀察其在胚胎不同發(fā)育階段的分布變化。這有助于揭示胚胎發(fā)育的分子機(jī)制,了解各個(gè)細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程中的分化方向和功能特化。在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究中,免疫熒光可以顯示信號(hào)分子在細(xì)胞內(nèi)的定位。當(dāng)細(xì)胞受到外界信號(hào)刺激時(shí),細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路會(huì)被***,各種信號(hào)分子會(huì)發(fā)生磷酸化、移位等變化。通過(guò)免疫熒光標(biāo)記這些信號(hào)分子,就可以直觀地看到它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)的位置變化,從而深入研究細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過(guò)程和調(diào)控機(jī)制。免疫熒光技術(shù)可以用于研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的定位和表達(dá)水平。r-H2AX免疫組化IHC
免疫熒光技術(shù)可以用于研究代謝疾病和內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能。r-H2AX免疫組化IHC
免疫組化在肌肉骨骼疾病的研究和診斷中扮演著重要的角色。肌肉骨骼系統(tǒng)包括骨骼、肌肉、關(guān)節(jié)等結(jié)構(gòu),這些部位的疾病會(huì)影響患者的運(yùn)動(dòng)功能和生活質(zhì)量。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的診斷中,免疫組化可以檢測(cè)關(guān)節(jié)滑膜組織中的炎癥細(xì)胞標(biāo)志物和自身抗體。RA是一種自身免疫性疾病,其主要病理特征是關(guān)節(jié)滑膜的炎癥和增生。免疫組化可以檢測(cè)滑膜組織中的CD4+T細(xì)胞、類風(fēng)濕因子(RF)等標(biāo)志物,了解炎癥反應(yīng)的程度和自身免疫反應(yīng)的情況,輔助診斷RA,并判斷疾病的活動(dòng)程度。在骨**的診斷方面,免疫組化可以區(qū)分不同類型的骨**。例如,骨肉瘤和軟骨肉瘤是常見(jiàn)的骨**類型,免疫組化可以檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中的標(biāo)志物,如骨鈣蛋白(osteocalcin)用于骨肉瘤的診斷,S-100蛋白用于軟骨肉瘤的診斷等。這有助于骨科醫(yī)生制定準(zhǔn)確的***方案,提高骨**患者的***效果。r-H2AX免疫組化IHC