變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對(duì)或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮?dú)饧?%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長良好。對(duì)于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時(shí),需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標(biāo)細(xì)菌能夠在抑制雜菌的同時(shí)良好生長。例如,改良愛德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對(duì)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌。在實(shí)驗(yàn)室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個(gè)多步驟的過程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進(jìn)行生化試驗(yàn)和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準(zhǔn)確地識(shí)別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。盡管哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)有許多優(yōu)點(diǎn),但也存在一定的局限性,如對(duì)嗜血桿菌生長的抑制以及受血液類型的影響。DNA酶試驗(yàn)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
TGE肉湯(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉湯,是一種用于微生物培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作為指示劑的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉湯(含TTC)的主要用途和特點(diǎn)如下:1.**用途**:TGE肉湯主要用于水、牛奶和乳制品中異養(yǎng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)。它適用于細(xì)菌總數(shù)的測定,也可用于檢測乳品中的耐熱細(xì)菌。2.**成分**:典型的TGE肉湯配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子,葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類提供能量。3.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。4.**制備方法**:將TGE肉湯的干粉溶解在蒸餾水中,加熱煮沸以幫助成分溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。5.**使用**:通常取一定量的培養(yǎng)基加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌,然后用于微生物的培養(yǎng)。6.**指示劑**:TTC作為指示劑,當(dāng)細(xì)菌代謝時(shí),TTC會(huì)被還原成紅色的三苯基甲烷,從而便于觀察細(xì)菌的生長情況。7.**保存條件**:未開封的TGE肉湯通常在室溫下避光保存,開封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長保存期。
蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)(TSSB)是一種用于分離和培養(yǎng)蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化鈉、苯酚紅和瓊脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作為可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持滲透壓,苯酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黃乳液使用,每100ml蠟樣芽孢桿菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黃乳液。5.**用法**:稱取本品43.0g加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時(shí),每瓶加入10ml50%的無菌卵黃乳液和多粘菌素B10000IU混勻,傾入無菌平皿,備用。6.**菌落特征**:蠟樣芽孢桿菌在TSSB上生長時(shí),菌落通常為微粉紅色,周圍有淡粉紅色沉淀環(huán),這有助于識(shí)別蠟樣芽孢桿菌。7.**質(zhì)量控制**:進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn)時(shí),按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)。
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養(yǎng)弧菌科細(xì)菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長的環(huán)境,高濃度抑制其他細(xì)菌生長。-蔗糖作為可發(fā)酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群生長。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應(yīng),檢測細(xì)菌產(chǎn)硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細(xì)菌利用蔗糖產(chǎn)酸會(huì)使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱取8.9g培養(yǎng)基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無菌平皿,備用。-注意:無需高壓滅菌。4.**不同細(xì)菌在TCBS瓊脂上的生長特征**:-副溶血性弧菌:藍(lán)綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。
SlantzandBartley培養(yǎng)基是一種專門設(shè)計(jì)用于分離和計(jì)數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于水和食品樣本中的腸球菌檢測。以下是它的一些特點(diǎn):1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氫鉀、疊氮鈉和瓊脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供細(xì)菌生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),葡萄糖作為碳源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,疊氮鈉作為抑菌劑抑制革蘭氏陰性菌的生長,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉對(duì)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,確保培養(yǎng)基的選擇性。4.**應(yīng)用**:開始設(shè)計(jì)用于通過膜過濾技術(shù)檢測和計(jì)數(shù)腸球菌,但也證明作為直接涂布培養(yǎng)基同樣有效。5.**配制方法**:通常稱取41.5g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至沸騰以溶解瓊脂,高壓滅菌20分鐘。滅菌后冷卻至45-50°C,并分裝進(jìn)培養(yǎng)皿。6.**質(zhì)量控制**:通過特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試,確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長。例如,腸球菌ATCC29212在該培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長,而大腸桿菌ATCC25922則應(yīng)被抑制。7.**儲(chǔ)存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在15-30°C的陰涼干燥處。配制好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2-8°C。GC肉湯基礎(chǔ)用于致病性奈瑟氏菌的分離,每100ml添加IsoVitaleX添加劑、V-C-N抑菌劑、無菌血紅蛋白粉各1支 。CW瓊脂 含卡那霉素預(yù)裝培養(yǎng)皿
哥倫比亞肉湯為非選擇性培養(yǎng)基,大多數(shù)微生物都能在其上生長良好,因此常用于微生物的初步分離和培養(yǎng)。DNA酶試驗(yàn)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值對(duì)李斯特氏菌的生長有影響。李斯特氏菌的適生長pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值相匹配。在這個(gè)pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長并表現(xiàn)出其特有的生物學(xué)特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對(duì)微生物生長至關(guān)重要,因?yàn)樗梢杂绊懀?.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內(nèi)活性高。2.**細(xì)胞膜功能**:pH值的變化可能會(huì)干擾細(xì)胞膜的完整性和功能,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會(huì)改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)中的pH值是通過添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會(huì)抑制李斯特氏菌的生長,或者導(dǎo)致其他非目標(biāo)微生物過度生長,影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)能夠準(zhǔn)確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實(shí)驗(yàn)室人員需要仔細(xì)控制和監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。DNA酶試驗(yàn)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿