強化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)皿

來源: 發(fā)布時間:2024-09-26

曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基(EosinMethyleneBlueAgar,簡稱EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于分離和鑒定腸道致病菌,尤其是大腸桿菌。以下是EMB培養(yǎng)基的特點和相關(guān)信息:1.**成分**:EMB培養(yǎng)基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、亞甲藍、曙紅鈉和瓊脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供細菌生長所需的氮源和其他營養(yǎng)元素;乳糖作為可發(fā)酵的碳源;氯化鈉維持滲透壓;曙紅鈉和亞甲基藍作為抑制劑和指示劑,能夠在酸性條件下結(jié)合形成黑色沉淀;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培養(yǎng)基是一種弱選擇性培養(yǎng)基,特別用于分離腸道致病菌,如大腸桿菌。它通過抑制非目標菌的生長,促進目標菌的生長,從而實現(xiàn)分離。4.**實驗原理**:曙紅鈉為酸性染料,亞甲基藍為堿性染料。細菌分解乳糖產(chǎn)酸時,細菌帶正電荷,可以與帶負電的酸性染料結(jié)合,即染上了曙紅鈉的顏色;如果細菌因產(chǎn)堿性物質(zhì)較多,帶負電荷時與帶正電荷的堿性染料亞甲基藍結(jié)合而使得菌落呈藍色。細菌產(chǎn)酸量較大時,染料可析出結(jié)晶形成金屬光澤。此外,BHI Agar可以根據(jù)實驗需要添加不同的補充劑,如血液、等,以增強其選擇性或提供額外的營養(yǎng)。強化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)皿

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營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是一種常用的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**成分豐富**:由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和瓊脂等成分組成,為微生物提供氮源、碳源、維生素、氨基酸和其他生長因子。2.**pH值適宜**:pH值通??刂圃?.0-7.4之間,適合大多數(shù)細菌和部分菌的生長。3.**凝膠性質(zhì)**:含有瓊脂作為凝固劑,使得培養(yǎng)基在冷卻后形成凝膠狀,便于微生物在表面形成菌落。4.**用途廣**:適用于多種微生物的培養(yǎng)、分離和鑒定,包括細菌、酵母和霉菌。5.**易于操作**:瓊脂培養(yǎng)基易于倒板和制備平板,適合實驗室常規(guī)使用。6.**穩(wěn)定性好**:在適當?shù)膬Υ鏃l件下,營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基可以長時間保持其性能。7.**觀察方便**:菌落形成在瓊脂表面,便于觀察和計數(shù),也方便進行菌落挑選和純化。8.**無菌操作**:在制備和使用過程中需要嚴格的無菌操作,以避免污染。9.**質(zhì)量控制**:培養(yǎng)基的質(zhì)量通過檢驗原理和微生物靈敏度試驗進行控制,確保其穩(wěn)定性和有效性。10.**執(zhí)行標準**:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的制備和使用遵循相關(guān)標準,如GB4789.28-2013《中華人民共和國食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》等。馬丁瓊脂平板通過添加適量的血液,BHI Agar能夠滿足一些苛養(yǎng)菌的生長需求,常用于酵母和霉菌的培養(yǎng)。

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月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡稱LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細菌生長需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細菌的生長。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗方法**:稱取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時,大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細菌無氣泡。5.**微生物靈敏度試驗**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時,觀察結(jié)果。

三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)是一種生化培養(yǎng)基,用于腸桿菌科細菌的生化反應(yīng)篩選,其特點如下:1.**用途**:TSI培養(yǎng)基用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、酚紅、硫酸亞鐵銨、硫代硫酸鈉和瓊脂,pH值控制在7.4±0.1(25℃)。3.**檢驗原理**:乳糖、葡萄糖和蔗糖作為可發(fā)酵糖類,其發(fā)酵產(chǎn)酸時通過酚紅指示劑測出,酸性呈黃色,堿性呈紅色;硫代硫酸鈉可被某些細菌還原為硫化氫,與硫酸亞鐵中的鐵鹽生成黑色硫化鐵沉淀;氯化鈉維持滲透壓;瓊脂作為凝固劑。4.**應(yīng)用**:TSI培養(yǎng)基特別適用于沙門氏菌等腸道致病菌的分離鑒定,通過觀察細菌在培養(yǎng)基中的生長情況、顏色變化和硫化氫產(chǎn)生等特征進行鑒定。5.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基64.5g,溶解于1000ml蒸餾水中,加熱煮沸1分鐘,分裝于試管,121℃高壓滅菌15分鐘制成高層斜面。6.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進行微生物靈敏度試驗,如大腸埃希氏菌和乙型副傷寒沙門氏菌,觀察其生長情況和特征性反應(yīng)。7.**儲存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。VRBA培養(yǎng)基的主要成分包括瓊脂、膽鹽、溴青紫紅(Violet Red Bile)、乳糖等。

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Endo培養(yǎng)基,也稱為遠藤氏瓊脂或EndoAgar,是一種用于微生物學(xué)檢驗的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的檢測。以下是Endo培養(yǎng)基的一些基本信息:**配方**:Endo培養(yǎng)基的典型配方包含蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、亞硫酸鈉和堿性品紅等成分,以及作為凝固劑的瓊脂。具體的配方比例可能根據(jù)不同的供應(yīng)商有所變化。**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至7.3±0.1(25℃)。**用途**:Endo培養(yǎng)基用于大腸菌群的檢測,特別是在水質(zhì)檢測中,如生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。**使用方法**:通常稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的蒸餾水或去離子水中,并添加無水乙醇,然后進行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,將培養(yǎng)基搖勻以防瓊脂沉積,備用。**培養(yǎng)基特性**:Endo培養(yǎng)基中的亞硫酸鈉和品紅對革蘭氏陽性菌有弱抑制作用。乳糖發(fā)酵型大腸桿菌和大腸菌群在該培養(yǎng)基上產(chǎn)生乙醛和酸,乙醛與亞硫酸品紅化合物反應(yīng),釋放出品紅,使菌落和周圍培養(yǎng)基變紅色。對于大腸桿菌,該反應(yīng)可能過于強烈,使得品紅結(jié)晶析出,給予菌落長久性的金色金屬光澤。**儲存條件**:Endo培養(yǎng)基通常需要在密封、陰涼干燥處保存,避免攝入、呼入和皮膚接觸。mTEC瓊脂培養(yǎng)基是一種用于尋找和分離腸道致病菌的培養(yǎng)基,尤其是對于大腸桿菌(Escherichia coli)等細菌。三丁酸甘油酯瓊脂BS培養(yǎng)皿

BHI Agar適用于多種需氧和兼性厭氧細菌的培養(yǎng),包括苛養(yǎng)菌和一些快速生長的細菌。強化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)皿

含0.05%聚山梨酯80的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液是一種特殊的緩沖溶液,它在普通的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液的基礎(chǔ)上添加了聚山梨酯80(Polysorbate80),這是一種非離子型表面活性劑。以下是這種緩沖液的一些特點:1.**表面活性劑**:添加了0.05%的聚山梨酯80,這是一種常用于醫(yī)藥和食品工業(yè)的乳化劑和穩(wěn)定劑。2.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.0,為微生物提供適宜的酸堿環(huán)境。3.**成分**:除了普通的氯化鈉、蛋白胨、磷酸鹽緩沖系統(tǒng)外,還特別添加了聚山梨酯80。4.**用途**:這種緩沖液可能用于需要表面活性劑的特定微生物培養(yǎng),例如某些需要乳化劑才能生長的微生物。5.**增加溶解性**:聚山梨酯80可以增加某些難溶物質(zhì)在緩沖液中的溶解性。6.**配制方法**:配制時除了按照標準方法添加氯化鈉、蛋白胨和磷酸鹽外,還需精確加入0.05%的聚山梨酯80。7.**質(zhì)量控制**:需要對添加聚山梨酯80后的緩沖液進行額外的質(zhì)量控制,確保其穩(wěn)定性和微生物培養(yǎng)效果。8.**儲存條件**:應(yīng)儲存在2~25℃,避光條件下,以保持聚山梨酯80和其他成分的穩(wěn)定性。強化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)皿

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