強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一種專門用于培養(yǎng)梭菌屬(Clostridium)細(xì)菌的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營養(yǎng)成分**:RCM培養(yǎng)基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化鈉、醋酸鈉和L-半胱氨酸鹽酸鹽等,這些成分為梭菌提供碳源、氮源、維生素和生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),為梭菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù),特別適用于厭氧條件下梭菌的培養(yǎng)。4.**抑制作用**:醋酸鈉成分有助于抑制革蘭氏陰性菌和一些非目標(biāo)細(xì)菌的生長,使得RCM培養(yǎng)基更適合梭菌屬細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)。5.**穩(wěn)定性**:微量瓊脂(0.5g/L)的添加增加了培養(yǎng)基還原環(huán)境的穩(wěn)定性,有助于厭氧環(huán)境的形成,防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散。6.**生長表現(xiàn)**:無動(dòng)力的細(xì)菌在RCM培養(yǎng)基中通常呈顆粒狀或條狀生長,便于計(jì)數(shù);而有動(dòng)力的細(xì)菌則可能呈現(xiàn)渾濁生長,一般不適合計(jì)數(shù)。7.**制備方法**:將RCM培養(yǎng)基粉末溶解于蒸餾水中,加熱至完全溶解后分裝,進(jìn)行高壓滅菌以備使用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:RCM培養(yǎng)基適用于生孢梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等梭菌的生長,這些菌株在培養(yǎng)基中的生長情況良好。將純培養(yǎng)的菌株涂布在TSA板上,培養(yǎng)至單一菌落后,將培養(yǎng)皿密封保存在4℃或-80℃的環(huán)境中。KF平板
無鹽麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkeyAgarwithoutsalt)是一種用于微生物學(xué)檢測(cè)的培養(yǎng)基,它與標(biāo)準(zhǔn)的麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的配方相似,但不含添加的氯化鈉。這種培養(yǎng)基特別適合用于尿液樣本的檢查,因?yàn)樗軌蛞种颇承┘?xì)菌的過度生長,如變形桿菌屬(Proteusspp.),這些細(xì)菌可能會(huì)在含有氯化鈉的培養(yǎng)基上擴(kuò)散生長,從而影響其他微生物的檢測(cè)。無鹽麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的特點(diǎn)包括:1.**抑制作用**:由于不含氯化鈉,它可以抑制某些革蘭氏陰性菌的生長,特別是那些在高鹽環(huán)境下生長的細(xì)菌。2.**用途**:主要用于分離和鑒定革蘭氏陰性菌,如大腸桿菌和沙門氏菌,同時(shí)也適用于食品和環(huán)境樣本的檢測(cè)。3.**菌落特征**:在這種培養(yǎng)基上,大腸桿菌通常形成紅色或粉紅色的菌落,而沙門氏菌和志賀氏菌則形成無色或淡色的菌落。4.**制備**:無鹽麥康凱瓊脂的制備方法與普通麥康凱瓊脂類似,通常包括將干粉與水混合,加熱至完全溶解,然后高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株來驗(yàn)證培養(yǎng)基的選擇性和生長促進(jìn)效果。6.**儲(chǔ)存條件**:通常需要在干燥、避光的條件下儲(chǔ)存,并在用后立即旋緊瓶蓋,以保持其穩(wěn)定性。MiddleBrook7H10瓊脂平板DC培養(yǎng)基的主要成分包括:葡萄糖、瓊脂、去氧膽酸鹽(Deoxycholate)、檸檬酸鹽。
品紅亞硫酸鈉液體培養(yǎng)基(EndoAgar),也稱為遠(yuǎn)藤瓊脂培養(yǎng)基,是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于飲用水和水源中總大腸菌群的選擇性分離和確證,符合GB(中國國家標(biāo)準(zhǔn))的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氫二鉀:3.5g-乳糖:10.0g-瓊脂:13.0g-堿性品紅:1.0g-亞硫酸鈉:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和礦物質(zhì)。-乳糖作為可發(fā)酵的糖類,用于檢測(cè)細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力。-亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色。-發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生乙醛,在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結(jié)合形成紅色菌落。-快速發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生金屬光澤,不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌形成無色透明菌落。**使用方法**:-稱取本品52.5g,加入20mL無水乙醇和980mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量),加熱攪拌溶解。-按需分裝,116℃高壓滅菌20分鐘,備用。-質(zhì)控菌液按國標(biāo)等標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成。-取相應(yīng)菌液按涂布或劃線方式接種于培養(yǎng)基中。-將接好菌的平板倒置放入恒溫培養(yǎng)箱,于36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí),觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(又稱為紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂,Kovac'sAgar)是一種選擇性培養(yǎng)基,用于分離和鑒定腸道細(xì)菌,尤其是大腸桿菌和其他發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性桿菌。以下是這種培養(yǎng)基的一些特點(diǎn):1.**選擇性**:膽鹽成分具有抑制某些細(xì)菌生長的作用,特別是對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌。2.**指示劑**:結(jié)晶紫和中性紅作為pH指示劑,可以反映細(xì)菌發(fā)酵糖類產(chǎn)生的酸性代謝產(chǎn)物。3.**成分**:包含葡萄糖作為可發(fā)酵的碳源,乳糖可能作為次要碳源,膽鹽作為選擇性抑制劑,結(jié)晶紫和中性紅作為顏色指示劑,以及瓊脂作為凝固劑。4.**pH敏感性**:在細(xì)菌代謝過程中,如果產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,會(huì)使培養(yǎng)基的pH下降,導(dǎo)致顏色變化。5.**菌落特征**:發(fā)酵乳糖的細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,導(dǎo)致菌落周圍出現(xiàn)紫色環(huán),而不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌則不會(huì)產(chǎn)生這種顏色變化。6.**應(yīng)用**:用于臨床樣本、食品樣本和其他環(huán)境樣本中的大腸桿菌和其他發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性桿菌的分離和鑒定。7.**制備方法**:通常按照制造商提供的配方稱取培養(yǎng)基粉末,溶解在蒸餾水中,加熱至沸騰以確保瓊脂完全溶解,然后分裝、滅菌,并在冷卻至適當(dāng)溫度后倒板。EMB培養(yǎng)基的特點(diǎn)是它對(duì)大腸桿菌等產(chǎn)酸革蘭氏陰性菌的選擇性較強(qiáng)。
伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點(diǎn)介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時(shí)加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個(gè)月。
改良配方提高了培養(yǎng)基對(duì)特定微生物的選擇性,有助于特定菌株的檢測(cè)和鑒定。KF平板
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基是一種專門用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營養(yǎng)成分**:培養(yǎng)基中含有蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖和牛肉浸粉等成分,其中蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,葡萄糖提供碳源。2.**pH值**:pH值控制在7.2±0.2(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于硫酸鏈霉素等抗生物質(zhì)的無菌檢查,也用于消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)中指示菌的培養(yǎng)。4.**制備方法**:稱取23.0g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,然后在121℃高壓下滅菌15分鐘,備用。5.**貯存條件**:需要防潮、避光、陰涼處保存。6.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:通過接種質(zhì)控菌株,如枯草桿菌黑色變種芽孢,進(jìn)行生長情況的觀察,以確保培養(yǎng)基的適用性。7.**質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)**:遵循中國藥典2020版、USP、EP等標(biāo)準(zhǔn)。8.**包裝規(guī)格**:市面上有多種規(guī)格的0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基產(chǎn)品,如250g/瓶。9.**注意事項(xiàng)**:在配制和使用過程中,需要保證器材潔凈,穿著實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,以確保實(shí)驗(yàn)的安全性和準(zhǔn)確性。這些特點(diǎn)使得0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基在藥品檢測(cè)和微生物學(xué)研究中具有重要應(yīng)用。KF平板