三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)是一種生化培養(yǎng)基,用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選,其特點(diǎn)如下:1.**用途**:TSI培養(yǎng)基用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、酚紅、硫酸亞鐵銨、硫代硫酸鈉和瓊脂,pH值控制在7.4±0.1(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:乳糖、葡萄糖和蔗糖作為可發(fā)酵糖類,其發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)通過酚紅指示劑測出,酸性呈黃色,堿性呈紅色;硫代硫酸鈉可被某些細(xì)菌還原為硫化氫,與硫酸亞鐵中的鐵鹽生成黑色硫化鐵沉淀;氯化鈉維持滲透壓;瓊脂作為凝固劑。4.**應(yīng)用**:TSI培養(yǎng)基特別適用于沙門氏菌等腸道致病菌的分離鑒定,通過觀察細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況、顏色變化和硫化氫產(chǎn)生等特征進(jìn)行鑒定。5.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基64.5g,溶解于1000ml蒸餾水中,加熱煮沸1分鐘,分裝于試管,121℃高壓滅菌15分鐘制成高層斜面。6.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),如大腸埃希氏菌和乙型副傷寒沙門氏菌,觀察其生長情況和特征性反應(yīng)。7.**儲(chǔ)存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。通過進(jìn)一步的生化測試,如氧化/發(fā)酵葡萄糖測試、花青素鑒定等,來進(jìn)一步確認(rèn)分離的菌株是否為目標(biāo)腸道菌。甘油甘氨酸瓊脂培養(yǎng)皿
大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基(TrypticSoyBroth,TSB)是一種通用的微生物培養(yǎng)基,應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別是在藥品抑菌劑效力檢測中用于細(xì)菌檢測。以下是其特點(diǎn)介紹:1.**成分**:TSB培養(yǎng)基含有胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、葡萄糖、磷酸氫二鉀和氯化鈉。胰酪胨和大豆木瓜蛋白酶消化物提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓。2.**pH值**:TSB培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)整至7.3±0.2(25℃),適合多種微生物的生長。3.**用途**:TSB培養(yǎng)基適用于的細(xì)菌培養(yǎng),包括需氧菌和厭氧菌。它特別用于消毒劑消毒效果的測試、蠟樣芽孢桿菌的多管發(fā)酵法測定、溶血性鏈球菌選擇性增菌培養(yǎng)等。4.**制備方法**:將TSB培養(yǎng)基粉末稱量后溶解于蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸以幫助溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:在使用TSB培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。6.**儲(chǔ)存條件**:TSB培養(yǎng)基應(yīng)在干燥、避光的條件下儲(chǔ)存,通常在室溫下保存。7.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下,TSB培養(yǎng)基的有效期通常為三年
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BrilliantGreenLactoseBileBroth,簡稱BGLB)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的確證試驗(yàn)。以下是其主要特點(diǎn)和相關(guān)信息:1.**成分**:BGLB培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛膽粉和煌綠。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,牛膽粉和煌綠則用于抑制非腸桿菌科細(xì)菌的生長。2.**配方**:每升培養(yǎng)基中通常包含10.0g蛋白胨、10.0g乳糖、20.0g牛膽粉和0.0133g煌綠,pH值調(diào)節(jié)至7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:蛋白胨提供微生物生長所需的碳氮源;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;煌綠是一種具有抑菌能力的染料,牛膽粉和煌綠抑制非腸桿菌科細(xì)菌。4.**使用方法**:稱取40.0gBGLB培養(yǎng)基,加入1000ml蒸餾水中,煮沸溶解,分裝到有玻璃小倒管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。5.**質(zhì)量控制**:通過接種特定的質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌ATCC25922、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、糞腸球菌ATCC29212等,進(jìn)行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。大腸埃希氏菌和弗氏檸檬酸桿菌在BGLB培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出生長,而糞腸球菌則應(yīng)不生長或生長微弱。
葉酸測定培養(yǎng)基是一種專門用于測定食品中葉酸含量的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營養(yǎng)成分**:該培養(yǎng)基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作為氮源和碳源,乙酸鈉作為選擇劑和能量物質(zhì),以及氯化鈉、硫酸錳等鹽離子和多種維生素成分,為鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2,以適應(yīng)特定微生物的生長需求。3.**用途**:主要用于食品中葉酸的微生物測定,如GB5009.211-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中葉酸的測定》中所述。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水或去離子水混合,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝試管中,每管5ml,加入標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品,用無菌蒸餾水或去離子水調(diào)整體積至10ml,121℃高壓滅菌5分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株(如鼠李糖乳桿菌ATCC7469)接種待測試培養(yǎng)基,在36±1℃下培養(yǎng)20-40小時(shí),觀察生長情況,如肉湯混濁和試管呈梯度渾濁。6.**儲(chǔ)存條件**:應(yīng)在避光、干燥處儲(chǔ)存,未開封保質(zhì)期通常為三年。7.**注意事項(xiàng)**:在配制和使用過程中,應(yīng)遵循無菌操作,避免污染,確保水的潔凈程度,因?yàn)樗械娜~酸殘留或容器的污染直接影響試驗(yàn)結(jié)果。將純培養(yǎng)的菌株涂布在TSA板上,培養(yǎng)至單一菌落后,將培養(yǎng)皿密封保存在4℃或-80℃的環(huán)境中。
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)腸道致病菌,特別是沙門氏菌和志賀氏菌的培養(yǎng)基。以下是DHL培養(yǎng)基的一些主要特點(diǎn):1.**用途**:主要用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng),特別是沙門氏菌和志賀氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵銨、中性紅和瓊脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:去氧膽酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫產(chǎn)生,使菌落中心呈黑色;中性紅作為pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色,不發(fā)酵糖的菌落為無色。4.**用法**:稱取65.2g培養(yǎng)基,加熱溶解在1000ml蒸餾水中,待冷至60℃時(shí)傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),例如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和福氏志賀氏菌CMCC(B)51572,觀察其生長率和特異性反應(yīng)。6.**儲(chǔ)存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。EMB培養(yǎng)皿是用于培養(yǎng)和檢測腸道革蘭氏陰性桿菌的一種特殊培養(yǎng)基。胰蛋白月示瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿可以根據(jù)微生物的形態(tài)、生長速率、菌落顏色等特征進(jìn)行初步鑒定。甘油甘氨酸瓊脂培養(yǎng)皿
含0.05%聚山梨酯80的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液是一種特殊的緩沖溶液,它在普通的pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液的基礎(chǔ)上添加了聚山梨酯80(Polysorbate80),這是一種非離子型表面活性劑。以下是這種緩沖液的一些特點(diǎn):1.**表面活性劑**:添加了0.05%的聚山梨酯80,這是一種常用于醫(yī)藥和食品工業(yè)的乳化劑和穩(wěn)定劑。2.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.0,為微生物提供適宜的酸堿環(huán)境。3.**成分**:除了普通的氯化鈉、蛋白胨、磷酸鹽緩沖系統(tǒng)外,還特別添加了聚山梨酯80。4.**用途**:這種緩沖液可能用于需要表面活性劑的特定微生物培養(yǎng),例如某些需要乳化劑才能生長的微生物。5.**增加溶解性**:聚山梨酯80可以增加某些難溶物質(zhì)在緩沖液中的溶解性。6.**配制方法**:配制時(shí)除了按照標(biāo)準(zhǔn)方法添加氯化鈉、蛋白胨和磷酸鹽外,還需精確加入0.05%的聚山梨酯80。7.**質(zhì)量控制**:需要對添加聚山梨酯80后的緩沖液進(jìn)行額外的質(zhì)量控制,確保其穩(wěn)定性和微生物培養(yǎng)效果。8.**儲(chǔ)存條件**:應(yīng)儲(chǔ)存在2~25℃,避光條件下,以保持聚山梨酯80和其他成分的穩(wěn)定性。甘油甘氨酸瓊脂培養(yǎng)皿