無錫廣州永諾數(shù)字PCR如何選型

       MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成，該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù)，采用原創(chuàng)性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達皮升級，檢測線性范圍達到5個數(shù)量級，各項指標均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。

       MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 準確度不完全依賴于擴增效率。無錫廣州永諾數(shù)字PCR如何選型

研究方向

無創(chuàng)產(chǎn)前篩查

       無創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷, 如21號染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測或已知父母基因型的其它核酸病檢測(孟德爾相關(guān)遺傳疾病)。目前標本來源主要為血液，而待檢測的胎兒DNA受到母體DNA的干擾，影響了檢測的準確性。而QX200檢測系統(tǒng)獨特的微滴化技術(shù)完全可以作為二代測序法的補充來進行的無創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷，從而提高工作效率及節(jié)約成本。

轉(zhuǎn)基因食品或成分的檢測

       目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時采取定量PCR的標準曲線法，這種方法需要依賴于已知濃度的標準品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標準物質(zhì)的定標工作。 北京廣州永諾數(shù)字PCR現(xiàn)貨線性范圍達到6個數(shù)量級，靈敏度高達萬分之一。

與常規(guī)的PCR的方法相比，dPCR有很好的優(yōu)勢。

***定量

常規(guī)PCR和實時熒光PCR定量檢測都需要已知拷貝數(shù)的標準DNA制定標準曲線，由于樣品測定在各種條件上不會完全一致，會造成PCR擴增效率的差異，從而影響定量結(jié)果的準確性。而ddPCR不受標準曲線和擴增動力學(xué)影響，可以進行***定量。

樣品需求量低

在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優(yōu)勢。

高靈敏度

ddPCR本質(zhì)上是將一個傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬個**的PCR反應(yīng)，在這些反應(yīng)中可以精確地檢測到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品，且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。

高耐受性

由于目的序列被分配到多個微滴中，***降低了體系間的影響以及背景序列和***物對反應(yīng)的干擾，擴增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。

        精細診斷是精細醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，液體活檢作為一種無創(chuàng)、均一的檢測技術(shù)，迅速成為精細診斷領(lǐng)域的新星，2015年被《麻省理工大學(xué)科技評論》評選為年度**突破技術(shù)， 2017年入選世界經(jīng)濟論壇評出的全球**新興技術(shù)，引發(fā)了全球科研、臨床和產(chǎn)業(yè)界的極大熱情，已在**、產(chǎn)前診斷、***移植等疾病領(lǐng)域***被應(yīng)用。

       數(shù)字PCR技術(shù)與高通量的二代測序技術(shù)，共同組成液體活檢領(lǐng)域的兩大利器；數(shù)字PCR技術(shù)是公認的液體活檢領(lǐng)域靈敏度比較高的檢測方法，采用有限稀釋的方法將目標分子分割到**的反應(yīng)體系中，在不依賴標準曲線條件下實現(xiàn)靶標***定量檢測，能檢測低至0.01%的突變基因；Bio-Rad及Thermo Fisher目前是這一領(lǐng)域的主導(dǎo)者，分別采用微滴或芯片方式將樣本分割成兩萬份，MiniDrop?創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。

基因表達差異的監(jiān)測。

無創(chuàng)產(chǎn)前檢查

       鐮狀細胞貧血（sickle cell anemia）是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病，有嚴重的危害，可以導(dǎo)致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA（cff-DNA）HBB基因突變。結(jié)果顯示，dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒（n=45）和75%的女性胎兒（n=20）HBB基因的突變狀態(tài)。當cff-DNA濃度大于7%時，可以**的檢測出HBB基因突變[3]，可以說是相當厲害了。

油包水乳化微滴技術(shù)，在微管道中利用氣壓驅(qū)動生成十萬個微滴，單個微滴體積體積低至皮升級。無錫微滴式數(shù)字PCR原理

高靈敏度——數(shù)字PCR的靈敏度與同體積反應(yīng)體系的分割份數(shù)成正比。無錫廣州永諾數(shù)字PCR如何選型

與常規(guī)PCR方法相比，數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢：

       1、能夠完全定量：常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標準DNA曲線，但是由于待檢樣本與標準曲線不在統(tǒng)一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準確性。而數(shù)字PCR不受標準曲線和擴增動力學(xué)影響，可進行完全定量。

       2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本

       3、靈敏度高：數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個**PCR反應(yīng)，這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。

       4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個**反應(yīng)體系中，明顯降低了背景信號和yì zhì物對反應(yīng)的干擾，擴增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。

無錫廣州永諾數(shù)字PCR如何選型

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