南京JUE對定量數(shù)字PCR解決方案

精細診斷是精細醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，液體活檢作為一種無創(chuàng)、均一的檢測技術(shù)，迅速成為精細診斷領(lǐng)域的新星，2015年被《麻省理工大學(xué)科技評論》評選為年度**突破技術(shù)，2017年入選世界經(jīng)濟論壇評出的全球**新興技術(shù)，引發(fā)了全球科研、臨床和產(chǎn)業(yè)界的極大熱情，已在**、產(chǎn)前診斷、***移植等疾病領(lǐng)域***被應(yīng)用。數(shù)字PCR技術(shù)與高通量的二代測序技術(shù)，共同組成液體活檢領(lǐng)域的兩大利器；數(shù)字PCR技術(shù)是公認(rèn)的液體活檢領(lǐng)域靈敏度比較高的檢測方法，采用有限稀釋的方法將目標(biāo)分子分割到**的反應(yīng)體系中，在不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線條件下實現(xiàn)靶標(biāo)***定量檢測，能檢測低至0.01%的突變基因；Bio-Rad及ThermoFisher目前是這一領(lǐng)域的主導(dǎo)者，分別采用微滴或芯片方式將樣本分割成兩萬份，MiniDrop?創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。永諾生物MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR儀超越行業(yè)的10萬個微滴數(shù)，保證泊松分布所需要的充分的樣本量。南京JUE對定量數(shù)字PCR解決方案

MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成，該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù)，采用原創(chuàng)性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達皮升級，檢測線性范圍達到5個數(shù)量級，各項指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。-----深圳國產(chǎn)數(shù)字PCR品牌分辨率——低至0.1倍基因表達差異。

要了解為什么傳統(tǒng)PCR存在限制，務(wù)必要了解PCR反應(yīng)過程中發(fā)生了什么。基本PCR運行可以分為三個階段：指數(shù)期每個循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍（假定**反應(yīng)效率）。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴增，因為所有試劑均新鮮可用，反應(yīng)的動力學(xué)推動反應(yīng)有利于擴增子加倍。線性期（高變異性）隨著反應(yīng)繼續(xù)，一些試劑因擴增而被消耗。反應(yīng)開始減緩，并且每個循環(huán)的PCR產(chǎn)物不再加倍。平臺期（終點：使用傳統(tǒng)方法進行凝膠檢測）反應(yīng)停止，不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物，并且如果放置時間夠長，PCR產(chǎn)物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應(yīng)動力學(xué)，所以每支試管或每個反應(yīng)將在不同的時間點進入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內(nèi)，傳統(tǒng)PCR進行測量，又稱為終點檢測。

數(shù)字PCR為juedui定量，qPCR為相對定量，數(shù)字PCR較qPCR更精細、更靈敏。所以說，未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補充，在部分領(lǐng)域逐步替代熒光定量PCR。未 來這些領(lǐng)域?qū)V泛應(yīng)用到數(shù)字PCR：科研：高校（生命科學(xué)學(xué)院、環(huán)境學(xué)院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院）等。醫(yī)院：病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心：研究院單位、疾控中心、海關(guān)（出入境檢驗檢疫）、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè)：第三方檢測機構(gòu)、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。您了解數(shù)字PCR儀的優(yōu)勢嗎？

CNV（CopyNumberVariations，拷貝數(shù)變異）研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異，測序方法適用于高于30%的變異率檢測，而qPCR的比較**辨在1.5倍左右，數(shù)字PCR通過直接計數(shù)目標(biāo)基因與參照基因(拷貝數(shù)為1的基因，例如RNaseP)的數(shù)目， 計算比值，直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達到極高的拷貝數(shù)分辨精度。除此之外，dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待，而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標(biāo)準(zhǔn)品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應(yīng)用方向上，已經(jīng)有大量實驗數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能。采用微滴式技術(shù)高達100,000個的微滴。南通JUE對定量數(shù)字PCR代理商

理論上可覆蓋qPCR（熒光定量PCR)的所有應(yīng)用。南京JUE對定量數(shù)字PCR解決方案

數(shù)字PCR可以直接計算目標(biāo)序列的拷貝數(shù)，因此無需依賴于對照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以進行精確的***定量檢測；此外，由于數(shù)字PCR在進行結(jié)果判讀時 判斷有/無兩種擴增狀態(tài)，因此也不需要檢測熒光信號與設(shè)定閾值線的交點，完全不依賴于Ct值的鑒定，因此數(shù)字PCR的反應(yīng)受擴增效率的影響**降低，對PCR反應(yīng)***物的耐受能力**提高；數(shù)字PCR實驗中標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系分配的過程可以極大程度上降低與目標(biāo)序列有競爭性作用的背景序列濃度，因此數(shù)字PCR技術(shù)也特別適合在復(fù)雜背景中檢測稀有突變。南京JUE對定量數(shù)字PCR解決方案

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