上海永諾數(shù)字PCR原理

來源: 發(fā)布時間:2022-04-20

MicroDrop-100數(shù)字PCR有什么優(yōu)勢?

       1.MicroDrop-100數(shù)字PCR所產(chǎn)生的微滴數(shù)是目前市面微滴式數(shù)字PCR里相對較高的產(chǎn)品,可將樣品分割為10萬份,更符合泊松分布數(shù)學(xué)模型,可以忽略更多的誤差因素;此外,高微滴數(shù)在多重數(shù)字PCR上的優(yōu)勢也會更大。

       2.數(shù)字PCR可選全中文界面,對國內(nèi)用戶十分友好,可以說,拿到即可上手。

       3.數(shù)字PCR是一個開放性的平臺,在試劑方面除了產(chǎn)品列表上的檢測試劑盒,還有通用的反應(yīng)預(yù)混液,客戶自行設(shè)計引物探針即可進(jìn)行新項目的檢測。此外,永諾非常歡迎進(jìn)行定制、合作開發(fā)檢測試劑盒。


檢測數(shù)量一次可達(dá)96個樣品。上海永諾數(shù)字PCR原理

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       MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運(yùn)行生成400萬微滴,微滴體積達(dá)皮升級,檢測線性范圍達(dá)到5個數(shù)量級,各項指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。

       MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 MicroDrop-100數(shù)字PCR采用主流可靠的解決方案,由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成。

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       數(shù)字PCR通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應(yīng)單元(微滴),包含一個或多個拷貝的核酸分子(也就是說我們所說的 DNA 模板) ,這是與PCR或qPCR反應(yīng)比較大的區(qū)別,PCR或qPCR只在一個反應(yīng)體系中進(jìn)行,而數(shù)字PCR在每個反應(yīng)單元(微滴)中都會對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)束后統(tǒng)計熒光信號并分析。是不是聽起來特別高(yi)大(lian)上(meng)?舉個栗子,PCR或qPCR檢測突變像是在大海里撈一個會發(fā)光的針,周圍都是海水,很難看到針的光在哪,而dPCR就像把海水盛到好多個碗里面,瞧一眼很容易就知道哪個碗在發(fā)光了,而且,系統(tǒng)還會數(shù)出來到底有多少個碗里是發(fā)光的,多少個碗里是沒發(fā)光的,這樣一比,不就很容易的知道有多少數(shù)量的突變,就能做到***定量了。

       數(shù)字PCR(Digtal PCR)是一種核酸定量精密檢測的新興技術(shù)手段,于20世紀(jì)由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中,使每個反應(yīng)單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴(kuò)增的同時,加入可檢測熒光。待擴(kuò)增結(jié)束時,使用統(tǒng)計學(xué)方法采集每個反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測樣本中的核酸濃度。

       基于分液方式的不同,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR(Microfluidic digital PCR,mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(Chip digital PCR,cdPCR)。


CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗證。

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       在定量PCR時,我們常常糾結(jié)一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結(jié)了,因為數(shù)字PCR(digital PCR)來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來測定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測序結(jié)果驗證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。支持多重數(shù)字PCR,可選全中文分析軟件。上海永諾數(shù)字PCR原理

理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應(yīng)用。上海永諾數(shù)字PCR原理

       數(shù)字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。

       數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對每個單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計并計算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。


上海永諾數(shù)字PCR原理

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