昆明輔助生殖紡錘體Oosight Meta

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-29

在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細(xì)胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)之一,旨在提高女性生育能力的保存與利用。然而,傳統(tǒng)紡錘體觀察方法往往需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,這不僅破壞了細(xì)胞的活性,還限制了對(duì)其發(fā)育潛能的進(jìn)一步評(píng)估。傳統(tǒng)紡錘體觀察方法,如免疫熒光染色技術(shù),雖然能夠清晰地展示紡錘體的形態(tài),但其缺點(diǎn)在于需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定和染色處理,這一過程不可避免地會(huì)對(duì)細(xì)胞造成損傷,影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和臨床應(yīng)用。而Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)則通過利用紡錘體微管結(jié)構(gòu)的雙折射性,實(shí)現(xiàn)了對(duì)無需染色紡錘體的直接觀察。這一技術(shù)創(chuàng)新不僅保留了細(xì)胞的活性與完整性,還提高了觀察的實(shí)時(shí)性和動(dòng)態(tài)性,為卵母細(xì)胞冷凍研究提供了更為準(zhǔn)確和可靠的評(píng)估手段。紡錘體的一端連接著染色體,另一端則錨定在細(xì)胞兩極。昆明輔助生殖紡錘體Oosight Meta

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多極紡錘

      在有絲分裂時(shí)紡錘體一般有二個(gè)極。但是在多精入卵的卵細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、培養(yǎng)的HeLa細(xì)胞、雜種細(xì)胞等,隨著條件不同可形成有3、4個(gè)或者更多個(gè)極的紡錘體。當(dāng)存在多極紡錘體時(shí),染色體的后期分配便不規(guī)則,可形成幾個(gè)小核。用低濃度的秋水仙堿等藥物處理也能誘導(dǎo)出同樣的變化。木賊等特殊的植物體或胚乳細(xì)胞,往往在分裂初期形成多極紡錘體,及至分裂中期多數(shù)可恢復(fù)為二個(gè)極。

      長(zhǎng)期以來,科學(xué)家認(rèn)為在哺乳動(dòng)物胚胎的***次細(xì)胞分裂過程中,只有一個(gè)紡錘體負(fù)責(zé)將胚胎染色體分配到兩個(gè)細(xì)胞中。但歐洲研究人員利用小鼠開展的**近實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn),這個(gè)過程中實(shí)際上有兩個(gè)紡錘體,分別負(fù)責(zé)來自父親和母親的染色體[2]。

      雙紡錘體的形成可能部分解釋了為什么哺乳動(dòng)物在早期發(fā)育階段(胚胎*初的幾次細(xì)胞分裂中)會(huì)有非常高的錯(cuò)誤率。如果紡錘體的兩極沒有對(duì)齊和融合,那么,受精卵的遺傳物質(zhì)可能會(huì)被拉向3個(gè)或4個(gè)方向,而不是2個(gè)。而這種錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致?lián)碛卸鄠€(gè)細(xì)胞核的細(xì)胞產(chǎn)生,從而終止胚胎發(fā)育。雙紡錘體理論的提出提供了一種先前未知的機(jī)制。接下來需要探討的是雙紡錘體是否在人類中也發(fā)揮相同的作用。因?yàn)椋@將為研究如何改善人類不育***提供非常有價(jià)值的信息[3]。 武漢ICSI紡錘體胚胎發(fā)育紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞分裂周期的重要標(biāo)志。

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紡錘體觀測(cè)新技術(shù)提升“試管嬰兒”胚胎受精率

什么是紡錘體觀測(cè)儀?

      紡錘體觀測(cè)儀是利用光線經(jīng)過雙折射性的物體時(shí)產(chǎn)生的光程差,對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行動(dòng)態(tài)及無創(chuàng)觀察的顯微觀測(cè)系統(tǒng)。

紡錘體觀測(cè)儀主要有什么用處?

       紡錘體觀測(cè)儀主要用于ICSI注射時(shí)紡錘**置觀測(cè),避免ICSI注射時(shí)對(duì)卵子的紡錘體損傷。

       目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母細(xì)胞的紡錘體靠近***極體,通過定位***極**置于6點(diǎn)或12點(diǎn)方向,在垂直于***極體的3點(diǎn)鐘方向注入精子。但事實(shí)上,紡錘體的位置不是固定不變的,***極體不能精細(xì)預(yù)測(cè)所有卵母細(xì)胞紡錘體的位置,約39%的紡錘體并不能通過***極體預(yù)測(cè)。傳統(tǒng)的ICSI注射很可能損壞紡錘體,若紡錘體損傷很可能導(dǎo)致卵母細(xì)胞死亡或染色體異常。因此,在ICSI注射時(shí)對(duì)紡錘體進(jìn)行觀察,對(duì)于ICSI操作和受精結(jié)局都有非常重要的意義,可以顯著提高ICSI受精率,有大量文獻(xiàn)報(bào)道正常受精率在觀察到紡錘體的卵子中***高于未觀察到紡錘體的卵子(83.3% VS 77.2%)。

紡錘體儀還有什么作用?

      紡錘體觀測(cè)儀還可以對(duì)一代受精后的卵母細(xì)胞受精情況進(jìn)行評(píng)估,選擇未受精的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI***。

紡錘體

      特殊細(xì)胞器

      紡錘體(Spindle Apparatus),形似紡錘,是產(chǎn)生于細(xì)胞分裂前初期(Pre-Prophase)到末期(Telophase)的一種特殊細(xì)胞器。其主要元件包括微管(Microtubules),附著微管的動(dòng)力分子分子馬達(dá)(Molecular motors),以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu)。一般來講,在動(dòng)物細(xì)胞中,中心體是紡錘體的一部分。高等植物細(xì)胞的紡錘體不含中心體。而***細(xì)胞的紡錘體含紡錘極體(Spindle Pole Body),一般被視為中心體的同源細(xì)胞器。

       紡錘體是由大量微管縱向排列組成的中部寬闊、兩級(jí)縮小的如紡錘狀的結(jié)構(gòu)。在細(xì)胞分裂中,紡錘體對(duì)卵母細(xì)胞染 色體的運(yùn)動(dòng)、平衡、分配以及極體排出都非常重要。卵母細(xì)胞紡錘體的異常會(huì)導(dǎo)致減數(shù)分裂異常,產(chǎn)生非整倍體的卵母細(xì)胞或者成熟阻滯的卵母細(xì)胞。 紡錘體在細(xì)胞分裂過程中經(jīng)歷明顯的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。

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紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠

在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時(shí),**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí),通常認(rèn)為,卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處,然后在3點(diǎn)處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動(dòng),或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測(cè)儀,可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道,在進(jìn)行ICSI時(shí),觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。 紡錘體在細(xì)胞分裂末期逐漸解體,為細(xì)胞質(zhì)分裂做準(zhǔn)備。美國(guó)卵母細(xì)胞紡錘體卵質(zhì)量評(píng)估

紡錘體,作為細(xì)胞分裂的“引擎”,驅(qū)動(dòng)著生命的延續(xù)與多樣性。昆明輔助生殖紡錘體Oosight Meta

在紡錘體卵冷凍過程中,利用紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)紡錘體的變化。通過觀察冷凍過程中紡錘體的形態(tài)、位置及動(dòng)態(tài)變化,研究者可以判斷冷凍保護(hù)劑的效果、冷凍速率等因素對(duì)紡錘體的影響,從而優(yōu)化冷凍方案,減少紡錘體損傷。解凍后,利用紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)可以對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行再次評(píng)估。通過比較解凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,研究者可以判斷冷凍過程對(duì)紡錘體的損傷程度,并篩選出紡錘體形態(tài)完好的卵母細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作,提高受精率和胚胎發(fā)育質(zhì)量。昆明輔助生殖紡錘體Oosight Meta