安徽外泌體質(zhì)譜

泌體是細胞內(nèi)源性的小囊泡，由大多數(shù)細胞分泌。在抗原呈遞細胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后，人們對外泌體的興趣增強，并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。在過去幾年中，有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌，并討論了其潛在的生物學(xué)功能。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì)，總結(jié)了其生物學(xué)效應(yīng)，特別是免疫系統(tǒng)，討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡（EVs）表示了細胞間通訊的一個重要模式，作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。然而，我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。在細胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可被蛋白酶剪切，碎片作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合，喚醒細胞內(nèi)的信號通路。安徽外泌體質(zhì)譜

微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測平臺,這些方法包括免疫親和分離、膜過濾、納米線捕獲、聲納米過濾和確定性側(cè)向位移分選等。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網(wǎng)絡(luò)組成的緊湊單元,能夠處理皮升到微升范圍內(nèi)的黏性介質(zhì)樣品;且根據(jù)特定的功能,微通道可以相互連接,使用額外的特定裝置來微調(diào)流體運動。微流控技術(shù)能夠以極高的準(zhǔn)確性和特異性在微尺度上重現(xiàn)眾多實驗室過程,取代昂貴的設(shè)備,基于微流控技術(shù)的電化學(xué)外泌體檢測芯片已經(jīng)受到廣fan關(guān)注。外周血外泌體提取試劑盒成分超速離心是從生物體液或細胞上清分離外泌體的金標(biāo)準(zhǔn)方法。

血清和血漿為常規(guī)檢測樣本，具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點，是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評價提供潛在標(biāo)志物。血液外泌體來源的疾病標(biāo)志物主要包括蛋白質(zhì)和miRNA兩類。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠?qū)崿F(xiàn)胰腺ai早期診斷，利用該方法對血清中包含GPC1的外泌體進行檢測，能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。

外泌體即細胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡，多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開始被當(dāng)做細胞排泄物，但是近幾年，研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后，如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于NanoLett的一項研究中，研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)（LD-MDS），并取得成功。在這項研究中，研究人員將相關(guān)藥物錨定在活巨噬細胞膜上，細胞自身相關(guān)蛋白酶響應(yīng)開啟并將藥物轉(zhuǎn)載進入外泌體，順利遞送至肺轉(zhuǎn)移灶并且轉(zhuǎn)化為納米囊泡和次級納米囊泡，促進轉(zhuǎn)移性4T1病細胞的有效內(nèi)化和細胞死亡。之后，受損的4T1病細胞可以釋放次級納米囊泡和游離藥物分子，再破壞鄰近的病細胞。研究顯示，LD-MDS對體內(nèi)直徑小于100μm的肺轉(zhuǎn)移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率，并顯著壓制肺轉(zhuǎn)移。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制，通過促進或壓制釋放機制。

與PC-3細胞相比，PC-3細胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等，而外泌體囊泡內(nèi)蛋白質(zhì)則與來源細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)密切相關(guān)，包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外，外泌體中還攜帶有來源細胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質(zhì)。外泌體的完整囊泡結(jié)構(gòu)能夠保護其內(nèi)部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區(qū)分。外泌體提升

外泌體給后續(xù)實驗產(chǎn)生了許多障礙。安徽外泌體質(zhì)譜

circZKSCAN1在肝ai細胞中低表達且抑制肝ai細胞的增殖，ciRS-7則被認(rèn)為是非小細胞肺ai、結(jié)腸ai和胃ai等中流的預(yù)后指標(biāo)，其高表達與較高的臨床分期和較差的總體生存期相關(guān)。目前已發(fā)現(xiàn)組織、血液和外泌體中的circRNA分子表達失調(diào)，而多種circRNA的聯(lián)合檢測會提高外泌體標(biāo)志物的敏感性和特異性，甚至可達到90％左右。外泌體可作為納米載體來介導(dǎo)細胞間的信息傳遞，發(fā)揮信息傳遞作用的方式主要有：在細胞間轉(zhuǎn)移受體，通過配體受體介導(dǎo)的方式作用于受體細胞，向受體細胞轉(zhuǎn)移功能蛋白，通過膜融合方式向受體細胞傳遞mRNA、miRNAs或轉(zhuǎn)錄因子等信息。這些方式為中流靶向zhiliao開辟了新的途徑。安徽外泌體質(zhì)譜