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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-07-25

在當(dāng)代準(zhǔn)確醫(yī)療的大趨勢(shì)下,外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和醫(yī)治提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù)。根據(jù)種瘤來(lái)源的外泌體在肺病的發(fā)發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究,臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定合適的醫(yī)治方案,以達(dá)到改善肺病患者生存率,延長(zhǎng)肺病患者生存時(shí)間的目的。但是,針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,如:外泌體的純化及標(biāo)記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等。總而言之,外泌體的研究有著廣闊的前景,基于外泌體與肺病的研究,有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和醫(yī)治的有效措施,造福更多的患者。各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá),由其決定外泌體被運(yùn)輸往哪一種細(xì)胞。上清液提取試劑盒銷售

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外泌體是由細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的晚期內(nèi)泡小體以膜融合的方式通過(guò)胞吐方式主動(dòng)分泌到細(xì)胞外環(huán)境的一種直徑30-100nm的微型囊泡,其形態(tài)規(guī)則,呈圓形或橢圓形杯狀結(jié)構(gòu),不同類型細(xì)胞分泌的外泌體具有很多共性,包括膜上富含脂筏及豐富的跨膜蛋白,如四次跨膜蛋白家族成員CD63、CD81等,表面為類似于細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙分子層,具有一定的疏水性。外泌體能夠攜帶微小RNA(microRNAs,miRNAs)、RNA、蛋白質(zhì)等生物活性分子,并在細(xì)胞外環(huán)境穩(wěn)定存在,而且通過(guò)傳遞供體細(xì)胞信息,調(diào)節(jié)靶細(xì)胞的代謝通路。外泌體可由多種類型細(xì)胞分泌,妊娠期母體血清中存在表達(dá)胎盤堿性磷酸酶(placentalalkalinephosphatase,)的胎盤來(lái)源外泌體,并且在妊娠中發(fā)揮重要的作用。如何直接檢測(cè)外泌體外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷,成熟于多囊泡胞內(nèi)體,終于膜融合。

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為了解決外泌體實(shí)驗(yàn)遇到的上述的各種問題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì),眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細(xì)胞通過(guò)翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),暴露在外泌體膜外側(cè)3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過(guò)巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過(guò)細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4)?;谏鲜鲋R(shí),我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開發(fā),并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而喚醒靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。外泌體作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。

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外泌體的miRNA或蛋白質(zhì)等遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān),在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點(diǎn)或分子標(biāo)志物。對(duì)外泌體的研究,將有利于闡述肝臟及其疾病的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制,為尋求臨床可用的biomarkers和開發(fā)新的治理方法提供支持。外泌體可以通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和miRNAs進(jìn)行細(xì)胞間交流,從而作用于周圍的細(xì)胞并改變肝臟的微環(huán)境。細(xì)胞內(nèi)多泡體(MVBs)與細(xì)胞膜融合,釋放內(nèi)部的外泌體到細(xì)胞外,被其他細(xì)胞攝取,通過(guò)細(xì)胞膜融合或內(nèi)吞作用釋放攜帶的內(nèi)含物,在受體細(xì)胞中調(diào)控生理活動(dòng)。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過(guò)程。外泌體無(wú)法分析外泌體具有的生理功能,也是兩種提取方法的問題所在。遼寧外泌體PKH67

結(jié)果表明,PS親和法可以檢測(cè)到許多目前為止都無(wú)法檢測(cè)的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。上清液提取試劑盒銷售

外泌體研究可以指導(dǎo)診治肝損傷、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。藥物誘導(dǎo)肝損傷(DILI)大鼠模型中,尿外泌體中的蛋白含量減少,包括CD26、CD81和其他潛在的標(biāo)志物蛋白。而另一項(xiàng)研究則發(fā)現(xiàn)DILI大鼠血清中分離到的外泌體含有更高水平的蛋白,如HSP70、HSP90等。MSCs來(lái)源的外泌體可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞增殖相關(guān)基因表達(dá),減弱CCL4誘導(dǎo)的肝損傷。而酒精刺激會(huì)促進(jìn)外泌體的分泌,miRNAs水平也會(huì)升高,并促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌,喚醒單核細(xì)胞的分化。盡管已取得上述成果,我們對(duì)外泌體的研究尚不夠深入,外泌體在肝臟生理和病理中的重要作用及其臨床應(yīng)用仍有待繼續(xù)探索。上清液提取試劑盒銷售

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