北京外泌體iTRAQ

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志，而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等，且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨(dú)特的生物兼容性、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來(lái)瘤治理中有很大的利用價(jià)值。外泌體能夠裝載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等。作為小分子化合物載體，外泌體裝載姜黃素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究；已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì)，例如酶，細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)；外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA，siRNA）到靶細(xì)胞中，從而在生物學(xué)和致病過(guò)程中誘導(dǎo)遺傳修飾。外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而活躍細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。北京外泌體iTRAQ

外泌體中包含的mRNAs和miRNAs在進(jìn)入受體細(xì)胞后仍具有翻譯蛋白質(zhì)、促進(jìn)病毒感ran等功能。據(jù)估計(jì)，單個(gè)外泌體含有約≤100拷貝數(shù)的蛋白質(zhì)和≤10000拷貝數(shù)的核苷酸。不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體中既包含與細(xì)胞形成、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的共有成分，也包含與來(lái)源細(xì)胞的生物功能相關(guān)的特異分子。如B淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有大量的主要組織相容性復(fù)合體蛋白質(zhì)MHCclassⅡ和MHCclassⅠ，血小板和T細(xì)胞來(lái)源的外泌體則包含諸如血管性血友病因子、穿孔素和顆粒酶等特殊蛋白質(zhì)，而ai細(xì)胞來(lái)源的外泌體表面可能含有中流特異的蛋白質(zhì)分子。這類特異分子在外泌體介導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、參與生理病理過(guò)程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。北京CD63外泌體慢病毒外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體。

在過(guò)去十年中，細(xì)胞外囊泡已經(jīng)成為細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)，參與原核生物和高等真核生物細(xì)胞之間的生物信號(hào)傳遞，以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過(guò)程。此外，細(xì)胞外囊泡的病理生理作用開(kāi)始在包括癥狀、傳播性疾病和神經(jīng)變性疾病在內(nèi)的疾病中得到認(rèn)識(shí)，突出了醫(yī)治干預(yù)的潛在新靶點(diǎn)。此外，未修飾和工程化的細(xì)胞外囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應(yīng)用。該綜述回顧近在理解細(xì)胞外膜泡生物學(xué)和細(xì)胞外囊泡在疾病中的作用方面的進(jìn)展，討論新出現(xiàn)的醫(yī)治機(jī)會(huì)并考慮相關(guān)的挑戰(zhàn)。

除了siRNA和miRNA，mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運(yùn)輸。研究表明，在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來(lái)的外泌體含有中流細(xì)胞特異性的mRNA，而被愛(ài)潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細(xì)胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而，外泌體的這種運(yùn)載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期，Saydam等率先報(bào)道了利用多泡體(含外泌體)負(fù)載mRNA/蛋白進(jìn)行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對(duì)HEK-293細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP，其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;EGFP:增強(qiáng)型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處，并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC)，神經(jīng)鞘瘤的增長(zhǎng)被明顯抑制。采用磁珠法時(shí)，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響。

與干細(xì)胞不同的是：干細(xì)胞外泌體對(duì)受損的微環(huán)境不響應(yīng)，但它可以通過(guò)改變細(xì)胞外基質(zhì)，改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組，來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，生長(zhǎng)，增殖和分化途徑。因此，干細(xì)胞外泌體具有減少細(xì)胞凋亡、減輕炎癥反應(yīng)、促進(jìn)血管生成、抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能，在調(diào)控組織再生方面存在良好的臨床應(yīng)用前景。干細(xì)胞外泌體的優(yōu)點(diǎn)，體積?。杭{米級(jí)粒子，大小約為細(xì)胞的1/200，因此能很好地被人體所利用。免疫反應(yīng)程度低：外泌體不是細(xì)胞，只作為載具，外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原，免疫系統(tǒng)難識(shí)別，對(duì)人體影響小?？纱┩秆X障壁：體積小加上脂質(zhì)外膜的特性，使其可以通過(guò)血腦障壁，抵達(dá)腦部組織。泌體是細(xì)胞內(nèi)源性的小囊泡，由大多數(shù)細(xì)胞分泌。血液外泌體tmt

外泌體可以作為生物標(biāo)志物來(lái)對(duì)疾病進(jìn)行檢測(cè)。北京外泌體iTRAQ

瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)不斷地將外泌體釋放到周圍環(huán)境中去，同時(shí)，外泌體能在4℃保存96h，或是在-70℃下保存更長(zhǎng)時(shí)間，可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術(shù)的進(jìn)步，已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域，外泌體中存在黑色素瘤標(biāo)志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白，且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者，通過(guò)檢測(cè)MIA和S100B表達(dá)水平對(duì)黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質(zhì)上說(shuō)，液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來(lái)源上的延伸，進(jìn)一步豐富了檢測(cè)手段，而隨著外泌體的不斷揭秘，相信其會(huì)在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。北京外泌體iTRAQ

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