廣州外泌體染色

作用機制主要是旁分泌的間充質(zhì)干細胞（MSC）被普遍地用于醫(yī)治各種人類疾病。已經(jīng)證明沒有一個因素足以調(diào)解MSC的醫(yī)治效果。然而，由許多細胞（包括MSC）分泌的外泌體膜囊泡是有吸引力的候選物作為其功效的載體。外泌體可以運輸和運送大量的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸，并可以改變細胞和身體部位的功能。除了作為細胞間通訊的關(guān)鍵作用之外，外泌體越來越多地被認為是疾病的生物標志物和預(yù)后因子。此外，它們有潛力被用作臨床應(yīng)用基因和藥物遞送的載體。該文回顧了外泌體的生物發(fā)生、分子組成及其作為細胞間通訊的信使的作用，著重于其作為干細胞醫(yī)治的載體的潛力。外泌體作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。廣州外泌體染色

在免疫系統(tǒng)中，淋巴細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、肥大細胞等均可以產(chǎn)生外泌體。研究表明免疫細胞來源的外泌體能夠明顯影響機體的免疫調(diào)節(jié)機制，包括調(diào)節(jié)抗原呈遞、免疫激huo、免疫監(jiān)督等。不同免疫細胞來源的外泌體功能不同，以樹突狀細胞(該細胞具有免疫刺激能力，是目前能夠激huo初始T細胞的抗原遞呈細胞)來源的外泌體為例，其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細胞的成熟狀態(tài)。成熟的樹突狀細胞外泌體內(nèi)包含能夠直接激huoT細胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ，共刺激分子如CD40、CD8、CD86和熱激蛋白，這些分子使樹突狀細胞來源的外泌體具有抗原呈遞、調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的生物功能。細胞外泌體提取試劑盒生產(chǎn)廠家外泌體在免疫調(diào)控、肉瘤轉(zhuǎn)移和血管生成以及生物標志物等領(lǐng)域發(fā)揮著非常重要的作用。

一方面，外泌體可以通過調(diào)控細胞的惡性轉(zhuǎn)化如細胞增殖、遷移和侵襲，促進HCC的發(fā)生和發(fā)展。另一方面，惡性瘤細胞分泌的外泌體可以協(xié)同其他瘤細胞一起，調(diào)控瘤微環(huán)境，以利于HCC發(fā)展。人HCC細胞外泌體中含有的一系列miRNAs，會減弱其他HCC細胞中TGF-β通路上的蛋白表達，促進HCC細胞的生長。HCC細胞外泌體還會誘導(dǎo)非致瘤性肝細胞發(fā)生細胞遷移和侵襲，具有運動能力的HCC通過釋放外泌體誘導(dǎo)肝細胞分泌MMP-2和MMP-9，增強HCC細胞的侵襲能力。經(jīng)HCC中分離到的CD90+外泌體處理的內(nèi)皮細胞會表達更多的VEGF和VEGFR1，促進血管生成；同時誘導(dǎo)ICAM-1表達促進細胞轉(zhuǎn)移。還有研究表明外泌體參與HCC缺氧脅迫和藥物耐受的調(diào)控。

透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）是用于評估外泌體形態(tài)、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡。SEM和TEM均使用電子束產(chǎn)生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像，以區(qū)分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒，該方法還可用于檢查樣品的純度。TEM與SEM之間的區(qū)別在于檢測電子類別，在SEM中，電子與樣品中的粒子相互作用時會發(fā)生散射，捕獲并檢測散射的電子，從而生成粒子圖像。但是，在TEM中，不與粒子相互作用的電子穿過樣品，并使用熒光屏進行檢測。電子顯微鏡下外泌體大小不一，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預(yù)處理和制備要求較高，外泌體的提取方法和品質(zhì)會對電鏡結(jié)果造成影響；另外樣品的準備階段比較復(fù)雜，不適合進行大量快速的測量；而且由于樣本經(jīng)過了干燥、固定以及冷凍等預(yù)處理和制備過程，對生物樣本的結(jié)構(gòu)會造成一定的破壞，從而影響觀察的效果，無法準確測量外泌體濃度。確認外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制，通過促進或壓制釋放機制。

外泌體含有的信號分子能反映分泌細胞的生理狀態(tài)和功能狀態(tài),甚至還會包含細胞病態(tài)相關(guān)的分子信息,從而提供了豐富的潛在的生物標志物分子源。瘤細胞分泌的外泌體通過對大分子物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和傳遞調(diào)節(jié)臨近或遠處瘤生長的微環(huán)境,對促瘤生成及瘤增生、轉(zhuǎn)移發(fā)揮著不同的調(diào)節(jié)作用。瘤細胞分泌的外泌體還可以通過誘導(dǎo)耐藥和免疫抑制來促進瘤的發(fā)展。外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長時間,這些特點使得外泌體可應(yīng)用于瘤的早期診斷和預(yù)后判斷。靶向瘤的外泌體的標志物可能為瘤疾病的診斷和治理提供新的指標和途徑,對高危人群早期診斷和早期治理以降低或減緩瘤病例的發(fā)生上發(fā)揮著重要的作用。神經(jīng)細胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。湖南外泌體lncRNA測序

外泌體的提取的方式：過濾離心。廣州外泌體染色

被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為肉瘤的轉(zhuǎn)移準備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境。用肺轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞重新定向。外泌體的蛋白質(zhì)組學分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的肉瘤細胞來源的外泌體具有不同的整合素（integrin）表達譜，整合素α6β4和α6β1與肺轉(zhuǎn)有關(guān)，而整合素αvβ5與肝轉(zhuǎn)有關(guān)。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取，進而分別降低了肺和肝的轉(zhuǎn)移。進一步研究發(fā)現(xiàn)外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達。通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測肉瘤轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標。廣州外泌體染色

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