山東動物組織免疫組化怎么選擇

來源: 發(fā)布時間:2021-10-30

醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,提示cancer預(yù)后不良。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細(xì)胞的增生做出評價,表達指數(shù)越高,表明其增殖指數(shù)越活躍,惡性度增高,預(yù)后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、EGFR陽性者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,并與ji素受體的表達呈負(fù)相關(guān)。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應(yīng)用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療,并能判斷預(yù)后,ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應(yīng)良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化流程是什么樣的?山東動物組織免疫組化怎么選擇

山東動物組織免疫組化怎么選擇,免疫組化

免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來檢測組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,簡稱ICC)。這兩個詞大家經(jīng)?;熘?,看著好像差不多,但實際上還是有點區(qū)別。IHCvsICC對于IHC,組織是來自患者或動物,經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過這種方法,研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位,同時維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu)。對于ICC,大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,只剩下整個細(xì)胞來染色。ICC的來源可以是細(xì)胞懸液,來自患者或動物(如血涂片、拭子等),或在實驗室中進行的組織培養(yǎng)細(xì)胞系。 青海切片免疫組化外包免疫組化protocol,詳情請看英瀚斯生物官網(wǎng)。

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免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片? 

(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是***我向一老師請教得出的結(jié)論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。

(2)冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步。缺點是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。

(3)石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

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免疫組化在什么情況下進行組織抗原修復(fù),抗原修復(fù)的條件是什么? 

(1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中,發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,從而失去抗原性。通過抗原修復(fù),使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測率。

(2)修復(fù)方法從強到弱一般分為三種,高壓修復(fù)、微波修復(fù)、胰酶修復(fù)。修復(fù)液也分為若干種(具體的可以查閱相關(guān)資料,大量的:中性的、高pH的等)。

(3)微波修復(fù),我們一般用6min*4次,效果不錯。

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免疫組化臨床應(yīng)用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類,初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,這同時也強調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個抗體。如果您有實驗外包的需求,可以與我們南京英瀚斯生物進行聯(lián)系,我們也有做免疫組化的服務(wù)!免疫組化結(jié)果怎么看?青海細(xì)胞免疫組化注意事項

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免疫組化的發(fā)展路程?在臨床病理診斷中,免疫組織化學(xué)(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段,從20世紀(jì)70年代開始,免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷,對于診斷cancer、cancer分類、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響,同時也擴展了人們對于各種疾病及cancer形成過程的認(rèn)識,提高了病理診斷與研究水平。但是,隨著免疫組化的廣泛應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術(shù),必須熟悉各種抗體真陽性反應(yīng)部位,實現(xiàn)實驗室間免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關(guān)的實驗,可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。山東動物組織免疫組化怎么選擇

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