病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TTC染色:TTC染色是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的甲月贊,用來表示細(xì)胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評價腦缺血損傷常用的指標(biāo)。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復(fù)合物,1894年初次合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會產(chǎn)生變化呈蒼白。TTC可以被活細(xì)胞中的具有還原活性的酶(好像主要是琥珀酸脫氫酶)還原生成粉紅色的還原產(chǎn)物,所以活組織部分呈現(xiàn)粉紅色,而死亡的細(xì)胞的還原酶的活力已經(jīng)消失,因此TTC不能被還原,所以死亡的組織呈現(xiàn)白色。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測 [南京英瀚斯] 一站式病理實驗外包檢測平臺。廣西真實病理實驗外包檢測
病理實驗外包,病理染色冰凍切片介紹;冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進(jìn)行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經(jīng)過任何化學(xué)藥品處理或加熱過程,明顯縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經(jīng)過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經(jīng)組織和一些組織化學(xué)的制片,并作為快速切片的方法應(yīng)用在臨床診斷。一、取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時即開始?xì)饣序v,此時小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結(jié)成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機冰凍切片。5.若需要保存,應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆谩D暇┯㈠?,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。廣西真實病理實驗外包檢測病理實驗外包檢測,免疫熒光染色,醫(yī)學(xué)科研實驗服務(wù)。
●原因:①組織脫水,透明不夠。②浸蠟時間過長、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中故導(dǎo)致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時間過久。●解決方法:①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時間。②依組織的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點確定浸蠟時間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補救。③脫水,透明滲蠟不夠,應(yīng)重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再進(jìn)行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因:①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟,刀口不干凈。③組織浸蠟時間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利。●解決方法:①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時一邊切片一邊用冰塊冰凍或換蠟。如室溫過高,可開空調(diào)降低室溫。②切片刀不干凈,可用棉花沾少許二甲苯將刀口拭干凈。③組織浸蠟不夠,可重復(fù)浸蠟過程。④將切片刀磨銳利再行切片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。
病理實驗外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致?!窠鉀Q方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時,注意修切整齊。④移動切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時石蠟凍結(jié)太慢。●解決方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時的缺點。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測-價格低-周期短-數(shù)據(jù)清晰。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹VonKossa染色:簡介:鈣結(jié)節(jié)的形成為成骨細(xì)胞特有,Vonkossa染色法是染色礦化結(jié)節(jié)的經(jīng)典方法,利用硝酸銀與鈣鹽的復(fù)分解反應(yīng)形成可被還原的銀鹽,在強光或紫外光下或者強還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。簡要流程:石蠟切片/細(xì)胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→硝酸銀滴染→蘇木素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→Vonkossa染**(鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,背景呈紅色;或者鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,背景呈紅色)。VonKossa染色利用金屬離子置換反應(yīng)檢測組織中鈣鹽沉積,由硝酸銀溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。該染色可用于血管鈣化的檢測南京實驗醫(yī)學(xué)平臺一站式病理實驗外包檢測平臺。湖南推薦的病理實驗外包服務(wù)
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病理實驗外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization),簡稱FISH。 是利用熒光標(biāo)記的特異核酸探針與細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子或RNA分子雜交,通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號,來確定與特異探針雜交后被染色的細(xì)胞或細(xì)胞器的形態(tài)和分布,或者是結(jié)合了熒光探針的DNA區(qū)域或RNA分子在染色體或其他細(xì)胞器中的定位。FISH比較常使用的靶序列是16S rRNA,根據(jù)rRNA目標(biāo)區(qū)域可設(shè)計寡核苷酸探針,進(jìn)行種屬特異性鑒定;將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下,選擇分散較好的區(qū)域來觀察。三色(或者更多)熒光激發(fā)下,觀察到不同顏色的熒光圖像。通常選用20X物鏡來掃描樣品雜交區(qū)域,40X或100X物鏡下觀察樣品,從一定的方向進(jìn)行計數(shù),并對計數(shù)情況進(jìn)行分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。廣西真實病理實驗外包檢測