病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色比較常見的紅藍(lán)失調(diào)答:(1)偏藍(lán)色:蘇木素染色過深,分化不夠;伊紅試劑過期;伊紅染色時間太短,分化過度。(2)偏紅色:蘇木素染色過淺,分化過度;組織固定不佳,細(xì)胞核不著色;脫蠟不徹底,蘇木素染不上;蘇木素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白色斑塊或斑點答:脫蠟前烤片溫度偏低,時間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。病理實驗外包檢測,醫(yī)學(xué)實驗,動物模型構(gòu)建。云南病理實驗外包公司
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹茜素紅染色:茜素紅S(AlizarinRedS)鈣染色法是一種旨在通過鰲和技術(shù),使鈣離子和茜素紅S產(chǎn)生復(fù)合物,來分析固定處理的細(xì)胞樣本中橘紅色鈣沉積現(xiàn)象的**而經(jīng)典的技術(shù)方法。主要適用于動物原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測。普遍用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。茜素紅S是橙黃色的針狀體。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素經(jīng)發(fā)煙硫酸磺化,然后轉(zhuǎn)變?yōu)殁c鹽制得。屬一種蒽醌(Anthraquinone)類的衍生物,是茜素磺酸鈉鹽,它能與鈣鹽以鰲和方式形成復(fù)合物,用以識別組織細(xì)胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過茜紅素染色,產(chǎn)生橘紅色沉積。茜素紅S是一種蒽醌類衍生物可與鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物。該染色可用于血管鈣化的檢測。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。云南病理實驗外包公司病理實驗外包檢測,基礎(chǔ)機制研究好幫手,只做真實實驗。
病理實驗外包,染色包埋的知識:知識點1:包埋的概念組織經(jīng)過固定、脫水、透明和浸蠟等過程后,用包埋劑(石蠟、火棉膠、樹脂等)將組織塊包埋成塊,使得組織和包埋劑相熔一體并迅速冷卻,這個程序稱為包埋。知識點2:組織石蠟包埋法石蠟包埋法是制作光學(xué)顯微鏡切片的常規(guī)方法,包埋后的組織可以長期保存。包埋的方法有包埋機包埋和手工包埋兩種。知識點3:體液石蠟包埋法痰液、胃液、尿液、胸腔積液、腹水等可以行石蠟包埋。痰液應(yīng)當(dāng)選用含血液的部分或較為可疑的實體部分,滴上伊紅后用皺紋紙包好,然后用10%的中性甲醛固定,再經(jīng)常規(guī)脫水,透明、浸蠟并包埋。新鮮的胃液、尿液、胸腔積液、腹水等體液標(biāo)本,倒去上層的澄清液體,將渾濁的液體放入離心管中,以轉(zhuǎn)速2000-3000轉(zhuǎn)每分鐘離心15分鐘,倒去上清液后,用10%中性甲醛固定沉淀物,然后進(jìn)行脫水透明、浸蠟、包埋。
病理實驗外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization),簡稱FISH。 是利用熒光標(biāo)記的特異核酸探針與細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子或RNA分子雜交,通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號,來確定與特異探針雜交后被染色的細(xì)胞或細(xì)胞器的形態(tài)和分布,或者是結(jié)合了熒光探針的DNA區(qū)域或RNA分子在染色體或其他細(xì)胞器中的定位。FISH比較常使用的靶序列是16S rRNA,根據(jù)rRNA目標(biāo)區(qū)域可設(shè)計寡核苷酸探針,進(jìn)行種屬特異性鑒定;將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下,選擇分散較好的區(qū)域來觀察。三色(或者更多)熒光激發(fā)下,觀察到不同顏色的熒光圖像。通常選用20X物鏡來掃描樣品雜交區(qū)域,40X或100X物鏡下觀察樣品,從一定的方向進(jìn)行計數(shù),并對計數(shù)情況進(jìn)行分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。不容錯過的病理實驗外包研究方法,南京英瀚斯生物。
病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,或分化時間太長。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,每個3-5min即可,接著重新染色。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來水沖洗10min染色。Q4:細(xì)胞核染色過深,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長;或切片太厚;或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包,真實靠譜的公司南京英瀚斯。云南病理實驗外包公司
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病理實驗外包,石蠟組織脫水注意事項1. 脫水必須在有蓋的玻璃品中進(jìn)行,防止吸收空氣中的水分。2. 在更換高一級的脫水劑時,比較好不要移動材料以免損壞,可用吸管吸出器皿中的脫水劑,再用吸水吸盡器皿內(nèi)剩余液,然后于皿中加入高一級脫水劑。3. 在低濃度酒精中,每級停留不宜太長,否則易使組織變軟,助長材料的解體。4. 在高濃度或純酒精中,每級停留的時間也不宜太長,否則會使組織變脆,影響切片。5. 如需過夜,應(yīng)停留在70%酒精中。6. 脫水必須徹底,否則不易透明,甚至使透明劑內(nèi)出現(xiàn)白色混濁現(xiàn)象。云南病理實驗外包公司
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