外泌體可以通過細(xì)胞外刺激、微生物攻擊和其他應(yīng)激條件的誘導(dǎo)等而生成。目前普遍的觀點(diǎn)認(rèn)為,異于普通微泡直接由細(xì)胞出芽脫落生成,外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷形成早期內(nèi)體,隨后在內(nèi)體轉(zhuǎn)運(yùn)復(fù)合體及一些相關(guān)蛋白的調(diào)控下,早期內(nèi)體內(nèi)出芽形成多個(gè)腔內(nèi)小囊泡構(gòu)成的MVB,后者比較后在GTP酶家族中的RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合向外界分泌腔內(nèi)囊泡,即外泌體。外泌體(Exosome)是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,分布于外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等體液中。外泌體與疾病的研究,南京英瀚斯生物。黑龍江細(xì)胞外泌體電鏡
外泌存在于人類的生殖,妊娠和胚胎發(fā)育需要精細(xì)/動(dòng)態(tài)的細(xì)胞間通信。**、羊水、血液和母乳都含有具有假定功能的外泌體。精漿外泌體與精子成熟有關(guān)。分子譜顯示,microRNAslet-7a,let-7b,miR-148a,miR-375和miR-99a富集于來自多個(gè)人類捐贈(zèng)者的精漿來源外泌體中,這些miRNA與白細(xì)胞介素(IL-10和IL-13)的表達(dá)有關(guān),提高了外泌體在生殖道常駐免疫中發(fā)揮作用的可能性。精漿來源的外泌體也能抑制HIV-1***,可能是通過阻斷HIV早期蛋白轉(zhuǎn)錄***劑(Tat)的招募和HIV-1的后續(xù)轉(zhuǎn)錄。黑龍江細(xì)胞外泌體電鏡外泌體提取鑒定分離實(shí)驗(yàn)平臺,認(rèn)準(zhǔn)南京英瀚斯。
外泌體的生成,微泡是由質(zhì)膜的出芽形成的,膜雙層通過磷脂的不對稱分布來維持脂質(zhì)的“多面性”。外層富含磷脂酰膽堿和鞘磷脂,而內(nèi)層主要由磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺形成。然而,胞質(zhì)Ca2+的內(nèi)流可以破壞這種不對稱性,導(dǎo)致磷脂跨膜雙層的重新分配,促進(jìn)膜起泡。依賴Ca2+的蛋白水解同時(shí)降解膜相關(guān)的細(xì)胞骨架,促進(jìn)出芽過程。在外泌體形成過程中,首先,MVE(多囊體)向內(nèi)芽形成小泡,內(nèi)含來自細(xì)胞質(zhì)的貨物(蛋白質(zhì)、mRNA和miRNAs)。然后,MVE要么與細(xì)胞膜融合釋放外泌體(內(nèi)囊泡),要么與溶酶體融合降解MVE含量。到達(dá)目的地后,外泌體通過內(nèi)吞途徑或與靶細(xì)胞膜融合,將其內(nèi)容物釋放到細(xì)胞質(zhì)中。細(xì)胞的膜的囊泡也可以直接從細(xì)胞膜上萌發(fā),攜帶活性蛋白、RNA和其他化合物。
外泌體是一類由細(xì)胞分泌的病毒大小的膜狀囊泡,它們攜帶有蛋白質(zhì)與核酸,調(diào)節(jié)著胞內(nèi)的溝通。目前較常用的外泌體提取方法是differential centrifugation (DC)——差速離心法。也有用試劑盒提取外泌體,但效率均不高。聚乙二醇(PEG)用于濃縮和純化病毒已經(jīng)超過50年,因?yàn)橥饷隗w與病毒有著較為相似的生物物理特性,因此作者考慮用聚乙二醇來純化外泌體,并且給出了新的濃縮提純外泌體的方法。是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,可由機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞如免疫細(xì)胞、干細(xì)胞、心血管細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞代做實(shí)驗(yàn),外泌體檢測服務(wù),實(shí)驗(yàn)樣本檢測。
外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體***于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。外泌體被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。不容錯(cuò)過的外泌體(Exosome)研究方法,南京英瀚斯生物。黑龍江細(xì)胞外泌體電鏡
外泌體的產(chǎn)生過程,南京英瀚斯生物。黑龍江細(xì)胞外泌體電鏡
外泌體的生物學(xué)功能取決于起源細(xì)胞和起源組織或細(xì)胞在外泌體產(chǎn)生時(shí)的狀態(tài)。先前的研究表明,外泌體可能像細(xì)胞垃圾袋一樣,排出多余和/或無功能的細(xì)胞成分。此外,內(nèi)吞囊泡還參與細(xì)胞表面蛋白和信號分子的循環(huán)。**近的研究表明,外泌體在不同的生物過程扮演重要的角色, 如血管生成、抗原表達(dá)、細(xì)胞凋亡、凝固、細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài),炎癥和細(xì)胞間信號。這些角色歸因于能力轉(zhuǎn)移核糖核酸,蛋白質(zhì),酶和脂質(zhì),從而影響生理和病理過程的各種疾病,包括**、神經(jīng)退行性疾病、***和自身免疫性疾病。黑龍江細(xì)胞外泌體電鏡
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