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編輯|steins來(lái)源|島津分析中心背景摘要:紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和熒光分光光度計(jì)都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行定量時(shí)基于朗伯比爾定律，測(cè)定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比。另一方面，利用熒光分光光度計(jì)時(shí)，使用熒光強(qiáng)度。在低濃度時(shí)，熒光強(qiáng)度與濃度成正比，所以，可以用于定量。本次使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和熒光分光光度計(jì)兩臺(tái)儀器分別測(cè)定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì)。關(guān)于測(cè)定結(jié)果，對(duì)兩個(gè)機(jī)種的定量、檢測(cè)下限值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度進(jìn)行了比較，下面將進(jìn)行介紹。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測(cè)定使用了紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)UV-260Oi測(cè)定樣品吸光度。測(cè)定條件如表1所示。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中，調(diào)配～5ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光光譜如圖1所示，根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2和圖3所示。在圖2中，用～5ug/ml的6點(diǎn)和空白樣品（蒸餾水）創(chuàng)建，得到了線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線（相關(guān)系數(shù)的平方值是)。在圖3所示的低濃度區(qū)域中，噪聲的影響相對(duì)較大，導(dǎo)致線性較差。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強(qiáng)度測(cè)定使用了熒光分光光度計(jì)RF-60O0測(cè)定了樣品熒光強(qiáng)度。測(cè)定條件如表2所示。紫外火焰光度計(jì)的光譜是帶狀光譜。上海f-100火焰光度計(jì)商家

兩束光合為一束。并交替通過(guò)入射狹縫進(jìn)入單色器中，經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上，色散并通過(guò)出射狹縫之后，被濾光片濾除高級(jí)次光譜，再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測(cè)器的接收面上。探測(cè)器將上述交變的信號(hào)轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào)，經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后，轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位，計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。元析儀器紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的概述不同：1、紫外分光光度計(jì)的概述：根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是比較大吸收波長(zhǎng)λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計(jì)的概述：由光源發(fā)出的光，被分為能量均等對(duì)稱的兩束，一束為樣品光通過(guò)樣品，另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過(guò)樣品室進(jìn)入光度計(jì)后，被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制，形成交變信號(hào)。三、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的應(yīng)用不同：1、紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用：將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定紫外可見(jiàn)吸收光譜。海南元析火焰光度計(jì)銷售公司在測(cè)定時(shí)，紫外可見(jiàn)火焰光度計(jì)受到強(qiáng)電磁場(chǎng)干擾，應(yīng)去除無(wú)線電干擾環(huán)境后，再次測(cè)量。

分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對(duì)應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長(zhǎng)。由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對(duì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是，當(dāng)吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直，此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

下面分光光度計(jì)使用中的那些事進(jìn)行了總結(jié)，希望能對(duì)你有所幫助。分光光度計(jì)是用不連續(xù)的波長(zhǎng)采樣反射物體或透射物體的一種測(cè)量?jī)x器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同，對(duì)不同波長(zhǎng)光線的吸收能力也不同，因此，每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長(zhǎng)的混合光中，將每一種單色光分離出來(lái)，并測(cè)量其強(qiáng)度的儀器叫做分光光度計(jì)。分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見(jiàn)光區(qū)，分光光度法則可以擴(kuò)展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū)。。火焰光度法檢測(cè)技術(shù)是基于氫火焰燃燒原理，火焰能夠分解存在空氣中的任何有毒有害物質(zhì)。

雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結(jié)果帶來(lái)一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。保持紫外-可見(jiàn)火焰光度計(jì)的有效通風(fēng)散熱。陜西大容量火焰光度計(jì)價(jià)格

紫外火焰光度計(jì)是測(cè)樣品中物質(zhì)吸收了光能量。上海f-100火焰光度計(jì)商家

試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對(duì)空白濾光片測(cè)定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶獲得測(cè)量準(zhǔn)確性的信息，也能提供精確度的信息，包括平均值和變異系數(shù)。在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí)，將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí)，測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度，以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì)，包括Eppendorf的所有儀器，都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢，但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過(guò)測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來(lái)校驗(yàn)檢測(cè)器，通過(guò)檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來(lái)校驗(yàn)光源。它還通過(guò)測(cè)定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來(lái)確定波長(zhǎng)的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來(lái)維護(hù)分光光度計(jì)，那么在今后的使用過(guò)程中再也不用擔(dān)心測(cè)量結(jié)果有問(wèn)題啦。上海f-100火焰光度計(jì)商家